Анализ ДНК спермограммы

От качества спермы напрямую зависит не только возможность оплодотворения яйцеклетки, но и здоровье будущего ребенка. Сперматозоиды несут генетический материал от отца. Повреждение ДНК мужских половых клеток может стать причиной бесплодия и спонтанных абортов. Выявить нарушение поможет анализ ДНК спермограммы с оценкой фрагментации.

Что показывает анализ?

Наиболее информативным методом диагностики репродуктивной системы мужчины является спермограмма. Исследование предполагает оценку количественных и качественных характеристик эякулята с целью выявить мужское бесплодие. Однако порой этого анализа бывает недостаточно, поскольку с его помощью невозможно определить фрагментацию ДНК сперматозоидов, которая может повлиять на фертильность мужчины.

Фрагментация ДНК является серьезным нарушением. Она представляет собой нарушение целостности структуры нуклеиновых цепочек, разрыв молекул. Если в семенной жидкости много сперматозоидов с повреждениями ДНК, то утрачивается фертильность. Сперма теряет способность оплодотворять яйцеклетку, поскольку несет поврежденный генетический материал.

ДНК спермограмма с оценкой фрагментации – это исследование, позволяющее определить количество сперматозоидов с поврежденной целостностью ДНК. Чтобы выявить генетические нарушения, проводится специальный тест. В ходе исследования целые ДНК подсвечиваются. Ореол вокруг них четкий. Сперматозоиды с поврежденной ДНК такого ореола не имеют или он нечеткий.

Показания к анализу

Анализ на повреждение цепочки ДНК проводится совместно со спермограммой. Комплексная диагностика позволяет получить более полную клиническую картину.

ДНК спермограммы с оценкой фрагментации назначают в таких случаях:

• неясное происхождение мужского бесплодия;
• частые выкидыши;
• замершая беременность;
• неудачные попытки ЭКО, ИКСИ;
• отклонения в показателях спермограммы;
• возраст мужчины старше 45 лет;
• варикоцеле;
• подготовка к ЭКО или ИКСИ;
• участие в донорстве спермы.

Бывает, что результаты спермограммы в норме, однако сперматозоиды имеют ДНК фрагментацию. Но чаще все наоборот – анализ спермы показывает отклонения.

Генетическое бесплодие, связанное с фрагментированной ДНК, диагностируют при таких нарушениях:

• азооспермия – отсутствие сперматозоидов в семенной жидкости;
• олигоспермия – недостаточное количество мужских половых клеток в эякуляте;
• высокая концентрация дефектных сперматозоидов;
• незрелые половые клетки, выявленные с помощью HBA-теста.

Для оценки фрагментации назначают ДНК спермограмму. Исследование позволяет диагностировать идиопатическое мужское бесплодие, то есть определить, что причина неудачных попыток зачатия именно в мужчине. После постановки диагноза, по результатам анализа, доктор составит эффективную схему лечения, даст рекомендации по укреплению здоровья или посоветует воспользоваться вспомогательными репродуктивными технологиями.

Анализ на ДНК фрагментацию при выборе ЭКО или ИКСИ

Сперматозоиды с повреждением генетической структуры чаще всего теряют способность к оплодотворению яйцеклетки. Но даже если фертильность и сохраняется, то поврежденная ДНК приводит к развитию пороков развития плода и внутриутробной гибели эмбриона.

Высокий уровень фрагментации приводит к невынашиванию беременности, проблемам с зачатием, влияет на успех в проведении ЭКО.

Парам, которые решили прибегнуть к вспомогательным репродуктивным технологиям, стоит предварительно пройти ДНК спермограмму. По ее результатам врач подберет оптимальный метод ВРТ:

• низкий и средний процент поврежденных молекул ДНК – внутриматочная инсеминация и ЭКО;
• высокий уровень фрагментации ДНК – ИКСИ.

Причины повреждения ДНК сперматозоидов

В норме мужской организм самостоятельно отбраковывает клетки с поврежденной ДНК структурой. Но если этот процесс нарушается, то в эякулят попадают дефектные клетки. Небольшая их концентрация не является проблемой. Но если в сперме поврежденных сперматозоидов больше, чем нормальных, то существенно снижается качество эякулята и вероятность естественного оплодотворения яйцеклетки.

Фрагментация ДНК происходит под действием свободных радикалов, за счет окислительных процессов. В норме им противостоят антиоксиданты. Они защищают половые клетки, поглощая свободные радикалы. Для определения причины фрагментации ДНК назначают анализ на антиокислительную активность семенной жидкости. Тестирование назначает врач после изучения анамнеза и результатов предыдущих исследований.

Какие факторы приводят к фрагментации ДНК?

Причин разрыва цепочек ДНК множество. На целостность генетического материала могут повлиять внешние и внутренние факторы.

Причины фрагментации ДНК:

• врожденные нарушения сперматогенеза, неполное созревание мужских половых клеток;
• сбой в механизме отбраковки дефектных сперматозоидов;
• окислительный стресс;
• варикоцеле;
• хронические воспалительные заболевания органов репродуктивной системы;
• инфекции, передающиеся половым путем;
• влияние радиации, химиотерапии, токсических веществ, лекарственных препаратов;
• регулярные стрессы;
• нездоровый образ жизни: вредные привычки, несбалансированное питание;
• возраст мужчины старше 45 лет;
• перенесенное вирусное заболевание.

Уровень фрагментации ДНК можно привести в норму, однако лечение зависит от причины генетических повреждений сперматозоидов.

Как фрагментация ДНК влияет на фертильность мужчины?

Разрывы ДНК, находящихся в ядре головки сперматозоидов, могут стать причиной мужского бесплодия. В молекуле нуклеиновой кислоты хранится генетическая информация, которая передается от отца ребенку. Чем существеннее повреждена молекула ДНК, тем ниже вероятность, что сперматозоид сможет оплодотворить яйцеклетку. То есть фрагментация влияет на репродуктивную функцию.

Если даже мужская половая клетка, несущая поврежденный генетический материал, оплодотворит яйцеклетку, то она может стать причиной тяжелых патологий, угрожающих жизни плода, например, онкологических заболеваний, генетических нарушений.

Методы фрагментации ДНК

В нашей клинике доступны прямые и непрямые методы ДНК спермограммы с фрагментацией. Первые позволяют выявить существующие разрывы в цепочке ДНК, а вторые – потенциальные.

Перечень методов фрагментации:

1. TUNEL. Является наиболее популярным методом для оценки фрагментации ДНК. Для проведения теста используется специальное красящее вещество, которое добавляют в эякулят. Поврежденные сперматозоиды окрашиваются. Лаборант рассматривает их под микроскопом, подсчитывает количество дефектных и здоровых, высчитывает индекс фрагментации. Референсное значение – 15%. Также в ходе исследования удается выявить одно- и двухцепочечные разрывы ДНК.
2. SCSA. Является самым первым тестом для определения фрагментации ДНК. Лаборант добавляет в эякулят кислый денатурирующий раствор и краситель. Клетки подсвечиваются лазерным лучом и рассматриваются под микроскопом. Если красящее вещество вступает в реакцию с нормальной молекулой ДНК, то она подсвечивается зеленым цветом, если с поврежденной – красным или желтым цветом. Данный метод чувствителен, референсные значения на уровне 20%.
3. SCD или его модификация HALOтест (Halosperm). Данный метод основан на подсчете неповрежденных сперматозоидов. Эякулят обрабатывают раствором кислоты, после прокрашивают и рассматривают под световым микроскопом. Клетки с целой ДНК образуют ореол дисперсии или halo-эффект.
4. DBD-FISH. Является сравнительно новым методом. Лаборант обрабатывает половые клетки щелочным раствором, а затем средой, содержащей ДНК-зонды, меченые флуоресцентно. Чем выше степень фрагментации ДНК, тем больше формируется одноцепочечных ДНК.

Крайне редко используются методы NT и COMET.

Какому методу стоит отдать предпочтение?

Метод исследования уровня фрагментации ДНК выбирает врач, исходя из проблем, с которыми обратился мужчина. Наибольшей диагностической ценностью обладают тесты HALO и TUNEL. Чаще всего специалисты нашей клиники отдают предпочтение этим методам исследования, поскольку они используются в большей части научных исследований влияния фрагментации ДНК на репродуктивную систему мужчины.

Прямой метод TUNEL позволяет выявить и одноцепочечные, и двухцепочечные разрывы молекул ДНК, поэтому дают врачу больше информации.

Подготовка к анализу и сдача спермы

К ДНК спермограмме требуется подготовка. Забор семенной жидкости происходит, как и при стандартной спермограмме – путем мастурбации. Мужчине выдается стерильный контейнер, в который он должен собрать весь объем эякулята. Важно соблюдать стерильность процедуры сбора. Нельзя касаться головкой полового члена или руками внутренних стенок емкости.

Сразу же после сбора сперму нужно отдать лаборанту для оценки показателей эякулята.

При подготовке к анализу нужно придерживаться таких рекомендаций:

1. За 2–5 дней до сдачи спермы воздержаться от половой жизни. Более длительное воздержание может повлиять на достоверность спермограммы.
2. За 2–3 дня до обследования вести спокойный образ жизни, воздержаться от тяжелых физических нагрузок, не посещать массаж простаты.
3. За 7–10 дней до анализа отменить прием лекарственных препаратов, употребление алкогольных напитков. Об отмене лекарств, назначенных по жизненно важным показаниям, принимает решение лечащий врач.
4. Минимум за неделю до оценки ДНК сперматозоидов отказаться от посещения бани, сауны, тепловых процедур.

Прохождение исследования лучше перенести, если в течение предшествующих двух недель мужчина принимал антибиотики или перенес заболевания, сопровождающиеся повышенной температурой тела.

Непосредственно перед сдачей эякулята нужно опорожнить мочевой пузырь, провести гигиену наружных половых органов с мылом.

Как проводят оценку фрагментации ДНК?

Специалисты нашей клиники используют достоверный и высокочувствительный метод оценки фрагментации ДНК – HALO-тест. Ход процедуры:

1. Лаборант смешивает сперму со специальным раствором, который окрашивает молекулы ДНК.

2. Под световым микроскопом специалист рассматривает сперматозоиды. Неповрежденные клетки имеют четкий ореол, который образуется вокруг ядра ДНК. Если генетический материал поврежден, то ореола нет или он едва заметный.

3. Лаборант подсчитывает количество здоровых сперматозоидов, результат записывает в процентах.

Дополнительно с анализом фрагментации ДНК назначают спермограмму и электронно-микроскопическое исследование спермы. Эти анализы позволяют составить максимально полную клиническую картину.

Расшифровка результатов анализа

Референсные значения у каждого теста свои, поэтому расшифровкой результатов занимается врач. В заключении указан индекс фрагментации ДНК. Доктор сопоставляет его с нормой. Если есть отклонения, специалист назначает лечение.

Расшифровка HALO-теста выглядит так:

1. Менее 20%. Это норма. Количество клеток с поврежденной ДНК не более 20% от общего числа сперматозоидов. Вероятность наступления беременности естественным путем высокая.
2. В пределах 20–30%. Могут возникнуть трудности с естественным зачатием, но оно не исключено. Однако из-за повышенного количества сперматозоидов с поврежденной ДНК существует риск выкидыша или пороков развития плода.
3. В пределах 30–50%. Зачать ребенка естественным путем не удастся. Придется прибегать к репродуктивным технологиям.
4. В пределах 50–60%. Показано ЭКО методом ИКСИ.
5. Выше 60%. Даже применение репродуктивных технологий не принесет желаемого результата. Рекомендуется обратиться к донору спермы.

Чем больше фрагментированная ДНК, тем ниже вероятность естественного оплодотворения.

Как лечить фрагментацию ДНК сперматозоидов?

Фрагментация ДНК – это патологическое состояние, требующее коррекции. Чтобы подобрать эффективное лечение, врач назначает дополнительное обследование, направленное на поиск причины. Фрагментация невысокой степени часто корректируется после устранения неблагоприятных факторов: вредных привычек, стрессов, инфекционных заболеваний и т. д.

Если количество сперматозоидов с поврежденной ДНК высокое, то проводится антиоксидантная терапия. Показана активная половая жизнь.

Лечение подбирается индивидуально для каждого пациента с учетом результатов обследования и особенностей организма.

В какой клинике можно сдать анализ на фрагментацию ДНК?

Врачи-андрологи и репродуктологи клиники «Чудо Доктор» имеют богатый опыт лечения бесплодия у мужчин. На первичном приеме пациент получает подробный план обследования, рекомендации по подготовке.

Лаборатория нашей клиники оснащена сверхточным современным оборудованием, позволяющим в короткий срок провести анализ семенной жидкости, в том числе фрагментацию ДНК. Мы гарантируем достоверность и высокую скорость обработки результатов, профессионализм наших специалистов.

Чтобы пройти спермограмму, тест на фрагментацию ДНК сперматозоидов или другие виды исследований, свяжитесь с нами по телефону или оставьте заявку через форму на сайте.

Вопрос – ответ